蛋白质免疫印迹法 (Western Blot ) ，简称WB ，是指通过SDS-PAGE胶将不同分子量的蛋白质分离开，然后将目标蛋白转移到载体(PVDF)膜上，利用抗原抗体的特异性结合，用特异性的一抗结合目标蛋白，用HRP标记的二抗结合一抗，再加以ECL发光液显色，检测组织或者细胞内某种或者某些特异性蛋白质的表达。蛋白质免疫印迹是做蛋白质分析的一种常规技术，常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析，还可以用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。

实验原理

免疫印迹法原理：将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。免疫印迹法是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术，免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。

我们的优势

1. 技术人员操作经验丰富，实验结果有保障

2. 细胞库丰富，拥有人、小鼠、大鼠、兔、猴等不同种属的细胞裂解液

3. 公司强大的产品库，有高灵敏度、高特异性的WB应用的抗体平台

实验流程

实验周期：1-2周

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服务流程

注意事项

1. 新鲜组织，组织＞30mg干冰运输。

2. 细胞量为5*10^6以上，收集细胞沉淀，干冰运输。

3. 样品蛋白浓度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/样品，细菌湿重＞1mg等。

4. 建议提供目的蛋白阳性表达样品（纯蛋白、有阳性表达的细胞或组织、商品化的阳性对照产品等）作为阳性对照。

5. 目的蛋白相应一抗：请您提供质量保证的一抗（或委托我公司准备）。抗体的使用量通过预实验后进行确认，原则上不回收使用一抗。

6. 阳性对照样品（尽量提供）。

7. 相关文献（可选）。

注：若有特殊处理的样品，请尽可能出示相关材料（具有保密性的材料除外）若要检测磷酸化蛋白，请在2-3个月内进行，因为长时间保存的样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。